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pcr缓冲液中各成分的作用是什么?是缓冲液中各成分的作用,不是缓冲液的作用,
 更新时间:2024-03-29 18:23:56
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问题描述:

pcr缓冲液中各成分的作用是什么?

是缓冲液中各成分的作用,不是缓冲液的作用,

乔卫民回答:
  基本常识   PCR包括7种基本成分:模板DNA、特异性引物、热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸(dNTP)、二价阳离子、缓冲液及一价阳离子.   其中缓冲液:一般使用Tris-Cl缓冲液,标准的为10mmol/L,并将其调节到8.8.8之间   配制方法(二种):   0.1mol/LTris-Cl(1000mL)   Tris碱12.11g;ddH2O800mL;HCl49mL   三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调pH至8.0,定溶至1000mL   0.01mol/LTris-Cl(1000mL)   Tris碱1.211g;ddH2O800mL;HCl49mL   三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调pH至8.0,定溶至1000mL   各成分作用:   Tris本身是一级胺,其pKa为8因此在pH7.8.5有良好的缓冲能力   CL-有一定的弱酸性
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